前言

GB 5009.35-2023食品中合成著(zhù)色劑的測定標準將于2024-03-06起實(shí)施，本次標準修訂在現有檢測方法的基礎上，擴充了能夠檢測的食品基質(zhì)類(lèi)型和著(zhù)色劑種類(lèi)，覆蓋了GB 2760-2014中規定的11種合成著(zhù)色劑（分別為檸檬黃、新紅、菜紅、藍、胭脂紅、日落黃、誘惑紅、亮藍、唾咻黃、赤蘚紅和酸性紅），以及允許添加的所有基質(zhì)大類(lèi)中的25種典型基質(zhì)。同時(shí)前處理方法也由聚酰胺粉變更為WAX混合型弱陰離子交換反相吸附或等效固相萃取柱。

本實(shí)驗參考標準《GB 5009.35-2023 食品安全國家標準 食品中合成著(zhù)色劑的測定》，使用EZsep™WAX固相萃取柱凈化樣品，再通過(guò)E.T.氮吹濃縮儀濃縮，高效液相色譜進(jìn)行檢測，建立了肉制品中合成著(zhù)色劑的分析方法。

1、實(shí)驗過(guò)程

1.1 儀器與試劑

LC-20AD液相色譜儀，島津企業(yè)管理（中國）有限公司；

MPREP-SPE08手動(dòng)固相萃取裝置，貨號：PZ0008，北京萊伯帕茲檢測科技有限公司；

E.T.氮吹濃縮儀，貨號：C020017，北京萊伯帕茲檢測科技有限公司；

EZsep™WAX固相萃取柱（150mg/6mL），貨號：PZ12103，北京萊伯帕茲檢測科技有限公司；

冷凍離心機，GL-20G-Ⅱ，上海安亭科學(xué)儀器廠(chǎng)；

甲醇（色譜純），購自賽默飛世爾科技（中國）有限公司；

甲酸，氨水，無(wú)水乙醇，乙酸銨，等化學(xué)品均為分析純或以上，購自國藥集團化學(xué)試劑有限公司；

水中11種色素混標，100μg/mL，壇墨質(zhì)檢科技股份有限公司。

1.2 工作液配制

取色素混合標準溶液1mL，用水稀釋至10mL容量瓶中，配制成濃度為10μg/mL的色素混標中間液。

移取10μg/mL的色素混標中間液0.02、0.05、0.1、0.2、0.5、1.0mL，分別用水稀釋至1.0mL容量瓶中，得到濃度依次為0.2、0.5、1、2、5、10μg/mL的標準系列工作液。

1.3 實(shí)驗部分

準確稱(chēng)取試樣2.0g，置于50mL具塞離心管中，先加入20mL石油醚,渦旋1min，超聲提取10min，10000r/min離心5min，棄去上清液，加入25mL乙醇氨水溶液，50℃超聲提取20min，10000r/min離心10min，取上清液置于50mL容量瓶中，每次加入約5mL乙醇氨水溶液重復提取操作四次，離心后合并上清液于50mL容量瓶中，用乙醇氨水溶液定容至刻度即得提取液。準確吸取提取液10mL，50℃氮氣濃縮至3mL左右，分3次共加入10mL5%甲醇水溶液溶解，作為待凈化液，待凈化。

將EZsep™WAX固相萃取柱（150mg/6mL，貨號：PZ12103）依次用6mL甲醇、6mL水活化后，取1.3.1待凈化液上樣，上樣結束后再依次用6mL2%甲酸水溶液、6mL甲醇淋洗固相萃取柱，之后用氮氣吹干萃取柱2min，以6mL 2%氨化甲醇溶液洗脫并收集洗脫液，經(jīng)E.T.氮吹濃縮儀在50℃下氮氣濃縮至近干，再加0.2mL甲醇，用0.02mol/L乙酸銨稀釋至2.0 mL，渦旋1min，PTFE微孔濾膜過(guò)濾，高效液相色譜測定。

1.4 LC分析

色譜柱：C18柱（250 mm×4.6 mm，5μm）

流動(dòng)相：A：0.02mol/L乙酸銨溶液 B：甲醇；

流速：1.0mL/min

檢測波長(cháng)：415nm、520nm、610nm

進(jìn)樣量：10μL

表1 流動(dòng)相梯度洗脫表

2、       實(shí)驗結果

表2 加標回收率結果

圖1 1.0μg/mL混標色譜圖

圖2 樣品加標色譜圖

圖3 空白樣品色譜圖

3、結論

本實(shí)驗使用EZsep™WAX固相萃取柱（150 mg/6mL，貨號：PZ12103，北京萊伯帕茲檢測科技有限公司）對肉制品中合成著(zhù)色劑進(jìn)行凈化后測定，該方法的加標回收率在62.2%~95.0%之間，RSD在0.5%~3.9%之間。準確性和精密度均滿(mǎn)足GB 5009.35-2023要求，且實(shí)驗方法穩定、可靠。

4、參考文獻

[1] GB 5009.35-2023 食品安全國家標準 食品中合成著(zhù)色劑的測定